溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結合的適宜溫度。在建立ELISA辦法作反應動力學研討時,實驗標明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1-2小時,產品的生成可達高峰。為加快反應,可進步反應的溫度,有些實驗在43℃進行,但不宜選用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜,以構成zui多的堆積。但因所需時刻太長,在ELISA中一般不予選用。
溫育保溫的考究:
保溫的辦法除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均選用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度敏捷平衡。為避免蒸發(fā),板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA板應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui終將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規(guī)矩的溫度,特別是在氣溫較低的時分更應如此。無論是水浴仍是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴峻束縛在規(guī)矩的范圍內,標準室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求操控溫育。室溫溫育時,ELISA板只需平置于操作臺上即可。應留心溫育的
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